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  • 乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)ELISA检测试剂盒说明书
  • 发布日期:2012-04-25
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【试剂盒名称】

通用名:乙型肝炎病毒表面抗原ELISA检测试剂盒(酶联免疫法)

英文名:HBsAg ELISA Detection Kit

Catalog # 17-0002

Lot #:

【用途】

检测样品中HBsAg含量。适用于疫苗生产企业质量检验或其它科研用。

【试验原理】

本品采用双抗体夹心法原理,用抗HBsAg单克隆抗体包被酶联反应板,加入待检标本反应后,用HRP标记的抗HBsAg单克隆抗体进行检测,通过TMB显色程度指示样品中EV71病毒含量。

【提供的材料与试剂】

1. 抗HBsAg单抗包被酶联板(Cat # 17-0002a/ Lot # :),12孔X8条

2. 酶结合物(Cat # 17-0002c/ Lot # :),96 tests

3. 酶结合物稀释液(Cat # 17-0002d /Lot # :),12ml

4. 20×洗液(Cat # SI00190/ Lot # :), 50ml

5. 样品稀释液(Cat # SI00191/ Lot #),12ml×2

6. 底物显色液A(Cat # SI00192/ Lot #),7ml

7. 底物显色液B(Cat # SI00193/ Lot #),7ml

8. 终止液(Cat # SI00194/ Lot #),7ml

9. 说明书,1份

【贮藏】2~8℃,避光保存,有效期6个月,本批试剂盒有效期至:

【操作步骤】

1. 将各种试剂移到室温(18~25℃)平衡半小时。取1瓶20×洗液,用去离子水稀释20倍,混匀后备用。

2. 将HBsAg单抗包被酶联板从密封袋中取出,将待检样品用样品稀释液稀释后,每孔加样品100μl,同时设阴性对照,37℃温育60分钟。

3. 弃去各孔内液体,洗板3次,每次静置30秒,拍干。

4. 在酶结合物中加入全部的酶结合物稀释液,溶解10分钟,充分混匀,每孔加100μl,37℃温育60分钟。

5. 弃去各孔内液体,洗板5次,每次静置30秒,拍干。

6. 每孔加底物显色液A 50μl,底物显色液B 50μl,轻轻振荡后置室温暗处显色5~10分钟,每孔加终止液50μl。

7. 选择酶标仪波长450nm,参考波长630nm,测定各孔A值。

【结果判定】

Cut off值=2 .1× N(N为阴性对照平均A值,如小于0.05按0.05计算)

1. 阴性对照平均A值应小于0.15,否则实验不成立。

2. 标本A值小于Cut off值为阴性,大于等于Cut off值为阳性。

【检测灵敏度与线性范围】

1.       灵敏度:Adw亚型 4ng/ml,Adr亚型 1.5ng/ml

2.       线性范围:Adw亚型:6.25~100ng/ml,  Adr亚型:3.125~50ng/ml

【产品性能指标】

精密度:CV(%)不高于15%(n=10)。

【该试验方法的局限性】

该试验仅作为检测疫苗中HBsAg用或其他科研用。

【注意事项】

1. 全部检测工作必须符合生物安全守则规定,严格防止交叉感染。

2. 检测结果的判定必须以酶标仪读数为准。

3. 标本和酶结合物均应用加液器加注,并经常校对准确性。

4. 各批次试剂不能混用。

 

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